馬拉松戰役后，希臘英雄特米斯托克列斯（沙利文·斯特普爾頓飾）射殺波斯國王大流士王，迫使薛西斯一世（羅德里戈·桑托羅飾）在海軍統帥阿特米西亞（伊娃·格林飾）煽動下組建復仇大軍。薛西斯率軍與斯巴達國王列奧尼達（杰克·奧康奈爾飾）及其三百勇士在溫泉關展開血戰，同時阿特米西亞統帥波斯艦隊逼近雅典。在希臘存亡之際，特米斯托克列斯聯合各城邦組建海軍，在愛琴海對抗阿特米西亞的復仇艦隊。薩拉米斯海戰中，希臘艦隊以火攻戰術重創波斯海軍，阿特米西亞重傷敗退。薛西斯在溫泉關取勝后率軍攻入雅典衛城，卻發現神廟早已空置。最終希臘聯軍在陸海雙重打擊下擊潰波斯主力，薛西斯被迫撤回亞洲，希臘城邦聯盟由此確立自由根基。