彼得帕克（托比·馬奎爾飾）是美國一名普通高中生，被蜘蛛博物館逃出的變種蜘蛛咬傷后獲得超能力：能從手指噴射強粘性蛛絲、飛檐走壁。起初他利用超能力賺錢，但當放跑的罪犯殺害其摯愛叔叔本后，他立誓以超能力打擊犯罪。好友哈利的父親諾曼（威廉·達福飾）經營的生物科技公司因飛行器未獲軍方訂單陷入困境，實驗中意外吸入神經毒氣導致人格分裂，化身佩戴面具的綠魔騎士。后者為證明自身價值劫持紐約市民、制造連環爆炸，并在最終對決中駕駛改良飛行器與蜘蛛俠搏殺。彼得識破諾曼雙重身份后，在教堂鐘樓展開殊死較量，通過精準蛛絲攻擊使失控飛行器反向刺穿諾曼要害。這場悲劇令彼得徹底理解“能力越大，責任越大”的真諦，他選擇以蜘蛛俠身份繼續守護城市，同時隱秘維系著平凡人的生活。