影片延續前作劇情，故事從“小丑”亞瑟（華金·菲尼克斯飾）被捕后展開，他在獄中等待著審判日的到來。在與自己的雙重人格纏斗時，亞瑟偶遇真愛——精神病學家哈莉·奎茵（Lady Gaga飾），兩人在共同策劃下逃離醫院，并通過一場融合謀殺與音樂的瘋狂行動向高譚市宣告小丑的重生。隨著亞瑟逐漸接受內心惡魔，他與哈莉策劃顛覆社會秩序，最終在法庭上揭露韋恩家族的罪惡真相。亞瑟以音樂劇形式演繹其扭曲救贖，徹底蛻變為無政府主義象征，并與蝙蝠俠展開宿命對決。